水貂细菌性疾病的流行病学调查

曹荣峰1，田洪宇，苏振渝

（莱阳农学院动物科技学院，山东青岛，266109）

摘要：对患病水貂进行病理剖检、细菌纯培养和生化鉴定，确定水貂细菌病的病原。经鉴定得到病原分别为变形杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌、耶尔森氏菌、葡萄球菌和绿脓杆菌。并对山东部分地区水貂细菌病的发病原因和规律进行了探讨。

关键词：水貂；细菌病；流行病学

1 前言 水貂是珍贵的毛皮动物，水貂的规模化养殖具有巨大的经济效益。从八十年代以来，山东省饲养水貂的养殖场逐年增多，据海关贸易总署统计，全国平均年产水貂皮1200万张，山东省占2/3。养殖水貂的利润很高，是农民脱贫致富的有效途径，深受农民的欢迎^[1]。近年来，水貂疾病的病毒病研究较为深入，并且已经得到一定的控制，而对水貂细菌性疾病的相关研究报道则很少。水貂被人工驯化以来，由于养殖规模不断扩大，水貂抗病力逐年降低。生理状态下的条件性致病菌，成为继发感染的主要病原，对水貂的危害性逐年加大^[2,3]。对水貂的养殖业带来巨大的经济损失，也制约了水貂养殖业的进一步发展。本文对山东省部分地区的水貂细菌病进行调查，从病死水貂体内钓取细菌，进行病原的分离和鉴定，为进一步防治水貂疾病提供基础。

2 材料

2.1 实验动物

2003年6月至2005年10月，选择山东省大规模养殖水貂的部分地区，进行调查取样。

2.2 实验器材和药品

无菌操作台、37℃恒温培养箱、生物显微镜、高压蒸汽灭菌锅、鼓风干燥箱；病理剖检器械，微生物学检测常规器械等。

肠杆菌科生化编码管GYZ-15e，葡萄球菌属生化编码管7H-16s，杭州天和微生物试剂有限公司出品；大肠杆菌因子血清、麦康凯琼脂、普通琼脂、普通肉汤，中国兽医药品监察所细菌制品检测室提供。SS琼脂平板等鉴定培养基自行配制。

3 方法

3.1 细菌的分离培养：

分别用无菌取样的方法取患病水貂的心血、肝、脾、肺、肾、胸腹水、脓液等病料，划线于普通琼脂平板上，37℃培养24h，挑取单个菌落划线于普通琼脂斜面并接种在营养肉汤中，37℃培养24h，即得到纯培养物。

3.2 生化试验：

首先钓取纯菌，做革兰氏染色镜检观察，革兰氏染色阴性者做O/F试验、氧化酶试验、触酶试验，氧化酶阴性再做葡萄糖发酵试验，葡萄糖发酵试验阴性菌者再用专用生化编码管GYZ-15e鉴定到属或种。革兰氏染色阳性菌者做触酶试验、氧化酶试验、O/F试验、葡萄糖产酸试验，再用专用生化编码管7H-16s鉴定到属或种。

3.3 大肠杆菌血清型O抗原鉴定

将大肠杆菌培养物于121℃高压灭菌2h，得到抗原。再取抗原分别与大肠杆菌多价血清、单因子血清进行平板凝集反应。先加稀释液，然后加入倍比稀释的大肠杆菌单因子血清（1:5），然后加抗原，37℃作用24h，室温放置2h后，判定结果。

4 结果

4.1 细菌分离结果

对山东省部分地区水貂饲养场的流行病学调查表明，4~10月份水貂细菌病多发。从病貂和死貂体内，分离出细菌31株。革兰氏阴性菌29株，属肠杆菌科；革兰氏阳性菌2株，为葡萄球菌属。

4.2 生化试验结果

生化试验结果见表1。将革兰氏阴性菌，用肠杆菌科GYZ-15e生化编码鉴定管鉴定出：变形杆菌13株，占41.9%，大肠杆菌8株，占25.8%，沙门氏菌3株，占9.7%，克雷伯氏菌2株，占6.5%，耶尔森氏菌2株，占6.5%，绿脓杆菌1株，占3.2%。将革兰氏阳性菌，用葡萄球菌属7H-16e生化编码鉴定管鉴定为，产气葡萄球菌和金黄色葡萄球菌厌氧亚种各一株，共占6.5%。结果表明，变形杆菌是本次分离的优势菌种，其次为大肠杆菌和沙门氏菌，而克雷伯氏菌、耶尔森氏菌、绿脓杆菌和葡萄球菌，发生较少。

表1 水貂细菌病分离细菌的种类

Table 1 The bacterial kind of mink bacterial diseases

4.3 血清型鉴定结果

对鉴定出的8株大肠杆菌分别进行多价、单因子血清平板凝集试验和试管凝集试验。鉴定结果如表2所示，大肠杆菌O抗原血清型为O₃₈、O₁₀₉、O₁₃₈、O₉₃的各1株；大肠杆菌O抗原血清型为O₁₀₇和O₁₁₇混合型的1株；有3株大肠杆菌未鉴定出血清型。

图1 水貂细菌病分离细菌的种类

Fig.1 The bacterial kind of mink bacterial diseases

表2 试管凝集试验结果

Table2 The result of agglutinating test in the tube

注：“–”表示无凝集；“#、+++、++”表示凝集程度由大到小的排列。