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6 免疫及分子生物学研究

由于疥螨寄生于宿主表皮角质层下且接近角质层，皮下细胞间液则可渗入到隧道或接近隧道及疥螨的口器。因此，一些可溶性抗原（如疥螨的唾液、粪便及体内的一些其他分泌物）就可以溶于细胞间液中，扩散至真皮，并刺激机体产生炎性反应和免疫反应。Arlian等研究发现疥螨的分泌物和排泄物是激活宿主免疫系统中T淋巴细胞和B淋巴细胞的抗原物质。他们以犬疥螨为研究材料对疥螨抗原、抗体的特征、提取方法进行了探讨，标明了犬疥螨抗原的部分特征，同时发现犬疥螨的提取物中共存在有9种抗原，其中7种抗原移向阳极一侧，2种抗原移向阴极一侧。疥螨的这些抗原物质既可激发机体的细胞免疫反应也可激发机体体液免疫反应，同时可促进循环抗体的选择性扩散和补体C3的外移以及抗体和补体C3在疥螨寄生部位处的上表皮和下表皮交界处的血管内沉积。

如今分子生物学技术几乎已渗透到了各个研究领域，尽管我国对疥螨的研究不够重视，仅限于一些药物疗效的考核上，但国外对疥螨的研究同样已深入到了分子生物学水平。目前基因库中总共已报道了疥螨的各种基因序列共1130条，而这些研究主要集中在疥螨基因文库的构建和抗原编码基因的筛选、克隆与表达等方面。

Walton等(1997)对18个具有高度重复序列（GA重复序列）的基因片段进行微卫星多态性观察，认为通过对疥螨特定基因序列的PCR扩增，并以扩增产物作为探针，可应用于疥螨流行病学的调查及疥螨的分类学研究。在应用微卫星标记对人和犬疥螨的同源性研究时，Walton等共发现了70种遗传突变因子，并认为这些遗传因子的突变是由特定的宿主决定的，而不是由地理环境所决定的。

Zahler等（1999）从4个洲的猪、牛、犬、红狐、银狐、袋熊、猞猁、狸、单峰骆驼、羚羊共10种动物体上分离得到了23个疥螨样品，并对提取到的样品DNA rRNA基因第二内部转录间隔（ITS-2）编码区进行特异性扩增。通过对扩增产物序列的分析，Zahler等发现这些样品存在一定表型上的区别（Phenotypic differences），但同时认为这些区别并不是由不同种的疥螨所引起，且与宿主及地理位置等因素没有相关性。实验结果最终表明所研究的10种动物的23个样品中的疥螨实为同一个种，并认为疥螨仅由一个单独的种组成，从而支持了Fain（1983）的观点。

由于疥螨的高度传染性与其在宿主皮下寄生有很大关系，到目前为止还没有方法能体外培养疥螨，用于各类研究的疥螨仍需从感染宿主的皮肤表皮分离得到，因而对疥螨许多方面的研究也都因此而受到限制。Mattsson等(2001)成功地构建了红狐疥螨的cDNA文库，并扩增克隆了一段能表达102.5 kDa蛋白的基因；经序列分析证实该基因为副肌球蛋白的表达基因；该基因的大肠杆菌重组体表达产物经血清学反应证实该产物即为副肌球蛋白。

Skerratt等（2002）对采自澳大利亚的袋熊、犬以及人的共23份疥螨样品的线粒体RNA12S基因序列进行了比较分析，结果发现在这些动物的疥螨中，其全长为326个核苷酸序列的线粒体RNA12S基因中共有12个变异位点和9种基因型（haplotype），且9种基因型之间通常有1～8个不同核苷酸变异。Skerratt等对9种基因型进行遗传学分析后，发现3种不同来源的疥螨（袋熊、犬、人）之间具有相似的12S基因序列，它们在亲源关系上非常接近；认为3种不同来源的疥螨之间并不存在种属差异，并提出线粒体RNA12S基因可作为疥螨种群鉴定的重要依据，从而进一步肯定了疥螨仅有1个种的观点。

7 诊断与防治

疥螨病的诊断主要是靠病原学诊断，即结合临床症状并从病变部位刮取皮屑或痂皮，将皮屑或痂皮置于显微镜下观察寻找虫体或虫卵来确诊。对皮屑或痂皮的处理一种方法是将皮屑倒入平皿内，加入甘油，在40～45℃温水中孵育1～2 h，再检查活虫和虫卵；另一种方法是用浓缩法，即将皮屑加到10% NaOH中，室温过夜或加热至沸腾，然后2 000 r/min离心5 min，检查沉淀中螨、卵；或在沉淀中加入60%硫代硫酸钠作漂浮，取液体表面检查。成功控制和净化疥螨的关键是正确使用杀螨药物。现今大多数注册的杀螨药均可以很好地控制甚至净化疥螨病。药物剂型以油制剂较好，因为油制剂可软化结痂。大量试验结果表明目前亚胺硫磷浇泼剂、双甲脒喷洒剂、碘硝酚、氯氰碘柳胺钠及阿维菌素类药物（伊维菌素ivermectin、阿维菌素avermectin、多拉菌素doramectin等）等都有较好的治疗效果。笔者认为由于疥螨特殊的生活习性，采取全身周期性给药和严格的环境灭螨，对疥螨病的防治将更为有效。

疥螨病的防治除使用药物外，尚无疫苗可使用。尽管寄生虫疫苗的研制，特别是基因工程疫苗的研制较为困难，但随着现代分子生物学的不断发展，疥螨基因文库的建成和完善，抗原编码基因的进一步筛选，疥螨基因工程疫苗的问世也并非不可能。随着人们对无公害畜禽产品及绿色食品意识的提高，笔者相信疥螨病的药物防治终将被疥螨疫苗防治所取代。